2.
1. 2. Material y equipo de laboratorio
El material y equipo de laboratorio en el cultivo de tejidos, requiere de materiales que permitan la
preparación de fórmulas nutrimentales con el objetivo de cultivar tejidos,
órganos y células vegetales in vitro. A continuación se presentarán los diferentes
materiales que se encuentran en un laboratorio de biotecnología:
Cristalería
La
cristalería de uso más común para el cultivo de tejidos se selecciona de la que
se utiliza en experimentos químicos o de microbiología; sin embargo, poco de
este material está diseñado especialmente por investigadores. Se utiliza
bastante material de vidrio en la preparación de medio de cultivo y en la
siembra de tejidos vegetales.
Tubos de ensayo
Se
utilizan muy frecuentemente en cultivos con pequeñas cantidades de soluciones o
bien para diversos tipos de medios. Normalmente las dimensiones de los tubos de
ensayo son de 2.0 x 15.0 cm, 2.5 x 15.0 cm o de 2.5 x 9.0 cm.
Estos
matraces se usan para preparar medios de cultivos sólidos o líquidos; en la
preparación de medios de cultivo. Se usan matraces de capacidad de 50, 125, 300
y 500 ml; de 1 y 2 litros dependiendo del volumen de trabajo.
Las cajas
de petri no sólo se utilizan para hacer cultivos en medios sólidos, también
para germinar semillas esterilizadas.
Para
propósitos de cultivar plantas en condiciones in vitro, se utilizan botellas
cilíndricas o cuadradas, que pueden ser las botellas de whisky, ron, brandy,
etc., que son resistentes a altas temperaturas y que son muy apropiadas para
los medios de cultivo sólido.
Botellas para reactivos y
soluciones madre
Se
requieren muchas botellas de polipropileno de 50 ml, 100 ml, 500 ml para
guardar soluciones madre o para hacer soluciones de varios reactivos.
Para la
preparación de diversas soluciones para la elaboración de los medios básicos
para el cultivo de tejidos vegetales se requiere de la cristalería siguiente:
Pipetas
graduadas: de 1, 2, 5 y 10 ml
Goteros
con pera de goma de 10 ml
Probetas
graduadas: de 25, 50, 100, 250, 500 y 1000 ml
Matraces
volumétricos: de 500 y 1000 ml
Matraces
aforados: de 50, 100 y 250 ml
Para la
distribución de un volumen de medio de cultivo se pueden usar diferentes
formas, por ejemplo vasijas de vidrio, embudos grandes con tubos de hule y
pinzas de compresión, columnas de vidrio con boca de salida o botellas de
inyección de Linger.
Cuando
son volúmenes pequeños de medios de cultivo es muy efectiva la pipeta
automática del tipo Cornwall.
Para el cultivo de
tejidos hay pocos aparatos e instrumentos diseñados especialmente para este
propósito. Sin embargo, se pueden escoger varios instrumentos médicos, así como
también muchos aparatos de microbiología.
Filtros y esterilizadores
Para la esterilización
del aire y líquidos se emplean filtros especiales. Uno de estos es el cilindro
de diatomeas que es usado para líquidos y consta de una abrazadera y un matraz
conectado a un extractor.
Cámara
de flujo laminar
La cámara de flujo
laminar inyecta aire ultra filtrado y esterilizado que permite
la manipulación de los tejidos sin que se presenten problemas de contaminación
por microorganismos como hongos y bacterias.
Hornos para secado
Estos hornos se usan
especialmente para el secado del material de vidriería lavado y para la
esterilización de instrumentos usados para el cultivo. Para la esterilización
por secado, la temperatura que se debe conservar es de 140°C durante 4h o bien
a 150°C – 180°C por una hora.
Autoclaves
Las autoclaves
esterilizan con vapor de presión y tienen dos sistemas de calentamiento: a base
de gas o de electricidad. Los modelos de autoclave son de tipo horizontal o
vertical.
Refrigerador
y congelador
Células, tejidos y
soluciones madres, se deben de conservar a bajas temperaturas y para ello se
requiere un refrigerador.
Balanzas
La preparación del
medio requiere de realizar el pesaje con precisión de todos los componentes que
lo integran con precisión y de acuerdo al tipo y a la cantidad del
constituyente que se agregue al medio, así será el tipo de balanza que se empleé.
Balanzas
analíticas
Estas balanzas tiene
una capacidad de 100 a 160g, y una precisión de 0.1mg, lo cual es muy útil para
pesar cantidades pequeñas de hormonas, vitaminas y otros microelementos.
Medidores
de pH
Para ajustar el pH de
los medidores de cultivo se utilizan indicadores de papel y químicos, pero lo
más conveniente es usar un potenciómetro con electrodos de vidrio.
Destilador
El agua exenta o con
una cantidad mínima de metales pesados es una condición primordial en el
cultivo de tejidos vegetales,
Agitador magnético
Este es un aparato
fundamental para la preparación de los medios de cultivo. Su uso permite la
mezcla de los constituyentes del medio durante la elaboración de las soluciones
madre o bien en la preparación del medio definitivo.
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